GL Sciences色譜柱老化的原則: 1、設置老化溫度時,決不允許超過固定液的高使用溫度。
2、根據(jù)涂漬固定液的百分數(shù)合理設置老化溫度,低含量固定液的柱子,老化溫度相對要低些。
3、老化時間與所用檢測器的靈敏度和類型有關,靈敏度越高,要求老化的時間相對越長。
4、老化時間的長短也取決于固定液的特性,“氣相色譜純的”要少于“工業(yè)純的”。
5、樣品的極性越強,要求填充柱老化的時間相對越長。
GL Sciences色譜柱使用受到影響的物理因素:
1、顆粒形狀及粒徑球形顆粒柱效高、重現(xiàn)性好、柱床結構均勻,不規(guī)則形柱床結構不均勻、流動相線速度不均勻,容易譜帶展寬;平均顆粒直徑,粒徑越小,柱效越高,柱壓也越高。粒徑分布越廣則柱效越低,壓力越大。
2、硅膠純度:硅膠純度和殘留金屬離子濃度,硅膠的雜質(zhì)會影響化合物的峰形,硅膠表面的金屬含量高會影響堿性化合物的峰形,易發(fā)生拖尾。
3、孔徑:顆粒的孔或腔的平均尺寸,大孔徑的填料顆??梢匝娱L大分子溶質(zhì)在填料表面的滯留時間,改善分離,所以大孔徑填料適合分離大分子化合物或者水動力體積較大的分子。
4、顆粒表面積:顆粒外表面和內(nèi)部孔表面的總和,相對而言高表面積對樣品具有較強的保留能力,更大的柱容量和分離度。而低表面積能更快達到平衡狀態(tài),更適合梯度洗脫程序。
5、色譜柱尺寸填料床的長度和內(nèi)徑,增加色譜柱長度,可以在一定程度上提高柱效,但也會升高壓力和導致峰展寬;寬柱徑,提高載樣量,但也會增加橫向擴散,同樣會導致峰展寬。窄柱徑可以節(jié)約溶劑,可減少橫向擴散,但壓力較大,對系統(tǒng)要求較高。